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兽用B超机与奶牛早期性别鉴定方法之比较
来源:未知|发布时间:2018-01-23 09:36
兽用B超机在奶牛胚胎学超声影像及***应用
兽用B超机可被用来估计胎龄,监测胎儿生长及诊断妊娠失调等。胎儿各部分如眼球、胃、肋骨等都可被探测到。为确定各器官发育情况应调整探头位置以获得***大扫描断层。还可根据胎龄计算出各组织生长相关系数。总之,可根据胎儿各器官大小判定胎龄和生长发育程度,同时建立奶牛胎儿变化的超声影像系统,并据此准确预报产期以利于生产管理。一般在生产中,用兽用B超机直肠探测奶牛的妊娠胎数和鉴定性别是同时进行的,这个适宜的时间范围是妊娠后的 55~75 天,通常在 67 天进行测定,妊娠时间太长或太短都不适宜做***。
***主要是通过定位与尾部和脐带有关的生殖结节来判断,具体为:脐带成像为一亮点,若脐带附近即胎儿腹部有另一亮点,而尾根部没有二个或三个亮点,可判为公的;若腹部只有脐带一个亮点,而尾根部有二个或三个亮点,即可判为母的。
 在做完一个胎儿的鉴定后,工作还没有结束,应该按上述方法探测是否还有其他胎儿存在并鉴定性别。大量的生产实践证明,除了极少数特例外,如母牛妊娠胎儿位置不好,较深,奶牛努责太厉害,以致手握探头不能成像清楚导致***失败,其他的情况,只要按正确方法仔细操作,都能探测出来。具体使用方法可以参考牛用B超机操作方面存在的问题及解决方法
奶牛早期***方法
(一) 细胞遗传学法
通过核型分析来完成胚胎***,***早用于兔、羊、牛。先取少量的胚胎细胞,在含有秋水仙素的培养液中培养,由于秋水仙素的阻抑作用使细胞的有丝分裂停留在中期,在渗透压的作用下使细胞膨胀,细胞壁破裂,染色体被释放,然后经固定和姬姆萨染色后在显微镜下观察。由于有丝分裂被阻滞在中期,故染色体缩短,形状规则,并有特异的带型,通过核型分析,确定其性染色体类型属XX还是XY型,这种方法鉴定胚胎性别的准确率几乎是100%,但操作过程比较烦琐。
(二) X染色体连接酶活力测定法
哺乳动物性染色体的类型,雌性为XX而雄性为XY型,为了维持性别之间的基因平衡,在胚胎发育的早期,雌性个体每个细胞中的一条x染色体是失活的,尽管这条x染色体失活的确切时间尚不知道,但可以肯定的是在这条染色体失活前有一段时间,两条X染色体均有活性,并进行转录,这表现在胚胎发育的早期,雌性胚胎x染色体连锁酶的活性是雄性胚胎的两倍。依据这一事实,Williams和Monk等检测了小鼠桑椹胚至囊胚期这段时间X染色体连锁酶的活性,即葡萄糖-6—磷酸脱氢酶的活性,以预测胚胎的性别,移植后分娩结果表明雌性、雄性胚胎的准确率分别为72%、57%。这种方法鉴定胚胎的准确率较低,主要原因是不知道X染色体失活的确切时间
(三) H—Y抗原法
目前利用H-y抗原进行胚胎***的方法有两种,即细胞毒性分析法和间接免疫荧光法。 
1.细胞毒性分析法
将胚胎培养在含有H-Y抗血清与补体(豚鼠血清)的培养液中进行培养,有H-Y抗原的胚胎表现出一定的细胞溶解,此类胚胎被判为雄性胚胎。能够继续发育即H-Y阴性的胚胎移植后所生仔鼠有86%为雌性。该方法以破坏雄性胚胎为代价,故现已很少采用。
2.间接免疫荧光法
先将8细胞至囊胚期胚胎与H-y抗体反应30min,再与用异硫氰酸盐荧光素(FITC)标记的免疫球蛋白M(IgM)抗体反应。然后在荧光显微镜下检查胚胎是否带有荧光素,若有荧光素则被判定为雄性。此法主要优点是不损害胚胎,准确率比较高,猪、绵羊、牛雌性鉴定准确率分别可达81%、85%和89%。但该方法需要荧光显微镜和丰富的经验。 
(四) Y染色体特异性DNA探针法
应用这一方法必须经过复杂的技术过程制备特异性的、经同位素标记的Y染色体特异序列的探针,用这一探针与从胚胎细胞中提取出的少量DNA杂交,杂交结果呈阳性的说明有Y染色体,可判为雄性。该方法准确率达90%。
    九十年代初,英国学者发现了存在于Y染色体短臂上的、决定雄性的DNA片段,定名为SRY,即性别决定区(基因)。这一发现被认为是九十年代以来生物科学的重大成就之一,为进一步开展性别控制研究奠定了基础。将其与聚合酶链反应(PCR)扩增技术相结合,应用于胚胎***,准确率可达100%;国内研究者已成功地用PCR技术直接扩增牛胚胎的SRY特异DNA序列,能够准确地鉴定牛胚胎的性别。
随着科学技术的进步快捷有效的方法是未来的发展趋势,兽用B超机在奶牛***方法有明显的优势,因此也是未来奶牛业主要检测工具.
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